Bakterilerde Spor Boyama Nedir?

Tanım

Bakteriler olumsuz çevre koşullarında endospor oluşturarak hayatta kalırlar. Spor boyama, bakterilerin oluşturduğu bu yapıları incelemek için kullanılan bir boyama yöntemidir. Spor oluşumu Bacillaceae familyasının tipik özelliğidir.

Spor bu familyanın üyeleri olan Bacillus ve Clostridium cinsi bakterilerde görülür (Sporolactobacillus, Desulfotomaculum ve kokobasil şekilli Sporosarcina da endospor oluşturan bakteri cinsleridir). Endosporlar sıcağa, kuraklığa, kimyasal maddelere ve radyasyona karşı dayanıklıdır. Bakteriler, olumsuz koşullara maruz kaldıktan yaklaşık 6 veya 8 saat sonra endospor oluşturabilir.

Bakteriyolojide genellikle kullanılan boyalar, gram boya ve metilen mavisidir. Sporlar kullanılan bu boyaları içlerine almamak için büyük direnç gösterir. Bu nedenle, farklı bir yöntem izlenir.

Yöntem

• Schaffer Fulton Yöntemi:

1. Sporların hücre çeperi çok kalın olduğu için alttan ısıtıldıklarında spor boyayı alırlar. Spor boyama için genel olarak malaşit yeşili boyası kullanılır.
2. Test edilecek organizmanın kültürü lama yayılarak (smear) preparat hazırlanır, hazırlanan preparat kurumaya bırakılır.
3. Malaşit yeşili (% 5) çözeltisi uygulanıp alttan ısıtma yapılarak, 5 dakika boyanır.
4. Preparat distile su ile yıkanır ve safranin ya da fuksin (%0.5) ile 30 saniye boyanır.
5. Preparat distile su ile yeniden yıkanır, kurutulur ve immersiyon merceğinde 100X’lik objektikte incelenir.
6. Boyama sonucunda endosporlar yeşil renkte görünür.

Kaynaklar:

1. https://www.austincc.edu/microbugz/endospore_stain.php
2. https://gida.erciyes.edu.tr/upload/RHTR2KObakterI-endosporlari-ve-spor-boyama-5.hafta.pdf

Görsel Kaynak: https://www.asmscience.org/content/education/imagegallery/image.3134

Editör: Molekülce Kaynak